マイクロプレート 96ウェル 3D ガラスボトム
µ-Plate 96 Well 3D Glass Bottom
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ウェル内にゲルマトリクス用の“内部ウェル”構造を有する3D培養に最適な96ウェルプレート。TIRFや超解像顕微鏡観察にも対応可能な高精細“No.1.5H”ガラス製カバースリップタイプ。
特長
- 3D培養に使用するゲルマトリクス用“内部ウェル”（φ4 mm）を備えたウェル形状
※培養⽤ゲルマトリクスは製品に含まれません。別途ご⽤意ください。 - 1ウェルあたりのゲルマトリクス量はたったの10 µLなのでコスト削減
- 血管新生のチューブ形成アッセイなどに最適：歪みが少ないゲルが作成しやすく、焦点エリアが広いムラの少ない顕微鏡観察が可能です。
- “No. 1.5H”ガラス製カバースリップ採用でTIRFや超解像顕微鏡観察にも対応可能
- サイズ規格は汎用性の高いANSI/SLAS（SBS）に準拠：マルチチャンネルピペットや自動分注ロボットにも適合
- バルクパック（個別包装）の取り扱いあり
- 滅菌済み
構造
ゲル界面のメニスカス形成を回避できる“内部ウェル”
µ-Plate 96 Well 3Dのゲルマトリックスを入れる部分は底面の一部に限られるため、１ウェルあたり10 µLのゲルしか必要としません。
このため高価なゲルの使用を削減することができます。
加えて、この内部ウェルを活用するとメニスカスの影響を受けない平らな界面を持つゲルが作成できます。
このため、顕微鏡の同一平面に捉えることができるエリアが広く、新生血管のような細い管構造などを観察するのに最適です。
（左）µ-Plate 96 Well 3D： 平らなゲル表⾯で広いエリアできれいに観察できます。
（右）⼀般的な観察容器： メニスカスの影響によりゲルが歪みます。このような場合、顕微鏡観察すると、周辺の対象にはピントが合いません。
No. 1.5Hガラスカバースリップのメリット
μ-Plate 96 Well 3D Glass Bottomには、D263 M Schott ガラス、工業規格No. 1.5H（170 +/- 5 µm）ガラスカバースリップボトムを使⽤しています。 No. 1.5Hガラスカバースリップは、顕微鏡観察用カバースリップとして広く普及しているNo. 1.5よりもさらに厚みのばらつきが少なく、高精細なカバースリップです。 このため、TIRFや超解像顕微鏡などの高倍率顕微鏡アプリケーションに最適な仕様です。
使用事例
血管新生のチューブ形成アッセイ
µ-Slide 15 Well 3D/µ-Plate 96 Well 3Dで作成したゲル上でHUVEC細胞を播種すると血管新生のチューブ形成アッセイに使用できます。
µ-Slide 15 Well 3Dでマトリゲル®上でHUVECを播種し12時間培養した様子
図左：血管形成したHUVEC位相差顕微鏡画像
図右：毛細血管拡大図。位相差顕微鏡画像／蛍光顕微鏡観察画像。緑：F-actin、⻘：核
スプラウトアッセイ
µ-Slide 15 Well 3D/µ-Plate 96 Well 3Dは、新生血管の内皮細胞からの発芽 (スプラウティング・sprouting)のような 、細胞群の発芽ポテンシャル解析にも使用できます。方法は、スフェロイドまたは組織⽚（例：⼤動脈のもの）を作成した3Dゲルマトリクスに置くだけ、大変簡便に実験系を組むことができます。
3Dセルカルチャー
µ-Slide 15 Well 3D/µ-Plate 96 Well 3Dの内部ウェルは、容器の総量に対する3Dゲル使用量が小さいため、ゲル使用量を抑制でき、３Dゲル培養において費⽤対効果の⾼いソリューションとなります。また、ゲルに対して培地の容量が大きく、物質の滞りが少ない３D培養環境を提供できることもメリットになります。
多様な使用方法が考えられ、３Dゲルマトリクスの内部に播種して使用できる（下図左）ことはもちろん、上部での培養や、それらを併せた共培養実験（下図中）などにも使用できます。また、内部ウェルに作成したゲル状に細胞を播種した後に、異なる3Dゲルマトリックスを付与すれば、異なる基質の間でサンドイッチ培養しながら細胞を生育することにも使用できます。この他にも、底面がカバースリップであることを活かし、血球やバクテリアなど浮遊細胞をゲルマトリクスで固定化し、顕微鏡観察のアクセスを向上させることなどにも活用できます。
免疫蛍光染色
ゲル内部やゲル上培養した細胞は、免疫蛍光染⾊し、解析することにも使用できます。
細胞の集積／細胞凝集体作製
µ-Slide 15 Well 3D/µ-Plate 96 Well 3Dの内側ウェルに充填するゲルが10 µL以下の場合、ゲル表面は凹型になります。このため、細胞をゲル中心部に集積させることや、スフェロイドを作成するために用いることもできます。
顕微鏡チャンバー
µ-Slide 15 Well 3D/µ-Plate 96 Well 3Dは、ゲルを使⽤せず、ローボリュームの顕微鏡チャンバーとしても使⽤できます。底面のカバースリップはibidiポリマー製（#1.5）とガラス製（#1.5H）の2種類選択でき、高倍率の顕微鏡観察用途にも対応できます。
仕様
| プレートサイズ（L×W） | 127.7 × 85.5 mm |
|---|---|
| 高さ | 16.5 mm（蓋装着時） / 14.4 mm（蓋無し） |
| ウェル間隔 | 9.0 mm |
| ウェルの容量 | 10 μL（内部ウェル）/ 70 μL（外部ウェル） |
| ウェルの内径 | 4 mm（内部ウェル）/ 5 mm（外部ウェル） |
| ウェル深さ | 0.87 mm（内部ウェル） |
| 培養面積（内部底面積） | 0.125 cm2 |
| 液量1 mL使用した場合のコーティング面積（内部） | 0.23 cm2 |
| ウェルクリアランス | 0.76 mm |
| 底面 | No. 1.5H（170 µm +/- 5 µm）ガラスカバースリップ |
