FastGene™ スクリプテース II

従来までMasterMixタイプの製品を扱っていなかったため、その点はとても扱いやすかった。
また、低発現遺伝子のRNAの逆転写効率が、従来まで用いていた製品よりも高い印象があった。

葉の発生の研究にあたって、様々なサイズの組織からRNAを抽出することがよくあります。
FastGene™ RNA Premium kit は、比較的多量の組織からごく少量の組織まで、単一のキットでカバーできる点や、少量の場合は最終溶出の容量を10μLまで減らせる点が使いやすく感じています。
また植物はイントロン配列が短いことからゲノムDNAのコンタミが問題になりやすいですが、本キットでは溶液中でDNase反応を行なうことで効果的にDNAの除去ができていると感じました。
逆転写酵素についても、長い配列をもつ遺伝子でもしっかりと逆転写できており、クローニング等の実験においては十分な品質であると感じました。
いずれも使用感や品質はこれまで使っていたキットと遜色がないですが、低価格なためとても使いやすいキットです。

本酵素は、Terminal nucleotidyl transferase (TdT) 活性を有するため、この活性を利用した5'RACEに利用可能かどうか試してみた。実際に、TdT活性を利用した5'RACE法の一種を本酵素で試みたところ、効率的に5'末端を決定することができた。
本酵素と各種プライマーを利用すれば、リーズナブルに5'RACEを行うことができる。

本酵素は、Terminal nucleotidyl transferase (TdT) 活性を有するため、この活性を利用した5'RACEに利用可能かどうか試してみた。実際に、TdT活性を利用した5'RACE法の一種を本酵素で試みたところ、効率的に5'末端を決定することができた。
本酵素と各種プライマーを利用すれば、リーズナブルに5'RACEを行うことができる。

従来のキットとFastGene ScriptaseⅡ を使用して実験を行いましたが、リアルタイムPCRの結果は、ほぼ同等の結果を示していると考えました。
操作の手間についても、ほぼ同等でした。
価格は、FastGeneシリーズの方が安い傾向にあるので、その点はメリットだと思います。

培養細胞のmRNA発現量を解析する目的で、使い勝手がよく、大量のサンプルを解析できる逆転写酵素を探していました。
少ないtotal RNA量で逆転写ができ、満足しています。

従来のキットとFastGene ScriptaseⅡ を使用して実験を行いましたが、リアルタイムPCRの結果は、ほぼ同等の結果を示していると考えました。
操作の手間についても、ほぼ同等でした。
価格は、FastGeneシリーズの方が安い傾向にあるので、その点はメリットだと思います。

感想としましては、Mixに全て準備されているのでとても楽でした。
今回は60 minインキュベートさせましたが、短時間でも十分反応することが示されているので、
今後使用する時には、より作業時間を短縮することができると期待しています。

既存のキット（T社）を使用していましたが、これに替わる廉価な逆転写酵素を探していました。
私の研究室ではFastGene社の製品をいくつか使用していますが、それらは廉価で質が良く評価が高いため、
今回の製品を試しました。結果、発現量の極めて少ない転写産物を検出することができ、
廉価なだけでなく非常に優れた逆転写酵素であることが分かりました。今後も使用していく予定です。

試薬が1つにまとまっているので良かった。