ライトサイクラー480 ハイレゾリューション・メルティング（HRM） マスター

特長

• LightCycler® 480専用 ハイレゾリューション・メルティング（HRM）試薬
• 反応試薬、ホットスタートPCR酵素、新規のDNA結合蛍光色素を含み、 PCR増幅産物のヘテロ2重鎖領域の増幅・検出に使用可能（例：ミューテーションスキャニングやジェノタイピングアプリケーション）
• 反応試薬はLightCycler® 480システムに最適化されているが、十分な検出系を備えた他機種においても利用可能
• データの取得はSYBR Green Iアッセイと同じ検出チャンネルを用いて実施することが可能
• PCR反応を阻害しない新規の蛍光色素を含む反応試薬により、首尾一貫したハイパフォーマンスを実現
• 反応試薬は非常に安定で、扱いやすく、自動化ワークフローでの使用に理想的
• Ready-to-useの2x濃度のホットスタート反応試薬により、試薬調製がしやすいため時間短縮が可能

図1　高解像度融解曲線分析(HRM)の原理

SYBR Green I との差

図2　高解像度融解曲線分析による野生型と異なる配列間の分離

(A) 96サンプルの異なる血液サンプルからHRM色素存在下でG → T 変異を含むヒトLPLH3遺伝子（フラグメントサイズ：163 bp）を増幅。

(B) 野生型（緑）サンプルとヘテロ接合体サンプル（青）間での蛍光シグナルの差異のディファレンスプロット解析

製品の記述

LightCycler® 480 High Resolution Melting Masterは基礎研究分野においてLightCycler® 480リアルタイムPCRシステムと組み合わせてご利用いただくようにデザインされています。
本製品はready-to-useな2x濃度のホットスタート反応試薬として提供されます。
25 mM MgCl₂ ストック溶液はマスターミックスとは別チューブで提供されており、各反応におけるMg²⁺ 濃度の検討が簡単に行えるようになっています。
LightCycler® 480 High Resolution Melting MasterはPCR産物のキャリーオーバーを防ぐためのウラシルDNAグリコシラーゼと組み合わせて利用できるようになっています。

キット内容

1. Master Mix, 2x concentrated, including high-resolution melting dye
2. MgCl₂, Stock Solution, 25 mM
3. H₂O, PCR-grade