Nanobind PanDNA kit

Nanobind PanDNA kit

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ハイクオリティな高分子ゲノムDNAを最適に抽出・精製。1つのキットで昆虫サンプルを含む全てのサンプル種に対応。

Nanobindとは?

Nanobindは、PacBio社が独自に開発した高密度シリカのナノ構造を利用したテクノロジーです(図1)。
Nanobindテクノロジーを磁気ディスクと組み合わせることにより、従来の磁気ビーズやシリカ製スピンカラムを使用するキットでは実現できなかった、ハイクオリティな高分子(~300+ kb)または超高分子(~1+ Mb)ゲノムDNAを抽出・精製することが可能となり、第3世代シークエンス時のN50値を大幅に向上させることができます。


図1. Nanobindによる高密度シリカ表面構造のSEM画像。

サンプルタイプに応じたNanobind 高分子ゲノムDNA抽出キットのラインナップ

細胞、全血、バクテリア用 全サンプル種用
Nanobind CBB Big DNA Kit Nanobind PanDNA Kit
(本製品)

Nanobind PanDNA Kitの特長:多様なサンプルを1つのキットで抽出

従来サンプル種ごとに分かれていたNanobind 高分子ゲノムDNA抽出キットシリーズの機能を単一ソリューションに統合しました。
培養細胞、細菌、全⾎、組織、植物の核、昆虫サンプルから⾼品質のDNA抽出が可能です。

  • ハイクオリティな高分子ゲノムDNA抽出キット
  • 1つのキットで全てのサンプル種に対応
  • 従来キットでは対応外だった昆虫サンプルからの抽出が可能に
  • 処理時間約 2 時間

さまざまな種類のサンプルから抽出されたNanobind HMW DNAのQCメトリクスの例

Nanobind PanDNA抽出プロトコルでは、通常50~300 kb以上のサイズのHMW DNAを5~25 μg得ることができます。
※サンプルの種類や質、および処理パラメータによって異なります。

さまざまな種類のサンプルから抽出された Nanobind HMW DNA の QC メトリクスの例

Note: High UV absorbance values are not always a guarantee of optimal sequencing performance (Not all inhibitors absorb at 230 and 280 nm). Conversely, low UV absorbance values are not always a guarantee that nonoptimal sequencing performance will be obtained ® gDNA samples with A260/280 ≥1.7 and A260/230 ratios ≥1.0 can still generate excellent HiFi sequencing performance (see PacBio Technical Note: Preparing DNA for PacBio HiFi sequencing – Extraction and quality control (102-193-651)).

1: The expected “normal” range for 260/280 and 260/230 ratios will vary depending on sample type. UV purities outside of these expected ranges may indicate abnormalities in the extraction process. Note: Some sample types that consistently yield lower UV purities can still sequence well.

DNA抽出QCおよびHiFiシーケンシング結果の例

Sample type Input material DNA yield DNA mode size HiFi mean read length HiFi yield Median QV
Human brain 6 mg 9.3 μg 195 Kb 16,164 bp 119 Gb Q36
Mouse lung 6 mg 9.1 μg 126 Kb 16,975 bp 121 Gb Q35
Human skeletal muscle 33 mg 3.9 μg 126 Kb 17,170 bp 101 Gb Q33
Lynx skeletal muscle 32 mg 5.8 μg 132 Kb 16,945 bp 98 Gb Q31
Ladybug 27 mg 5.3 μg 67 Kb 16,034 bp 86 Gb Q34
Cricket(legs) 44 mg 10.5 μg 118 Kb 15,731 bp 113 Gb Q35
Tobacco leaf (nuclei prep) 1 g 16.5 μg 140 Kb 14,649 bp 90 Gb Q34
Pepper leaf (nuclei prep) 1 g 26.1 μg 118 Kb 15,440 bp 94 Gb Q34
Apple leaf (nuclei prep) 1 g 11.3 μg 112 Kb 15,598 bp 106 Gb Q35

※HiFi データは、PacBio SRE キットで 18 ~ 20 kb に断片化され、サイズが選択された DNA から取得。 HiFi シーケンスは、Revio システムで 225 pM ローディングおよび 60 ~ 72% の P1 メトリ クスで実行。 HiFi データは SMRT® Link v13.0 を使用して分析。

ワークフロー

ワークフロー

図2.Nanobind HMW DNA 抽出ワークフローと1.5 mL チューブ内でNanobind ディスクに結合した DNA の写真

プロトコル

サンプルタイプ別プロトコルは下記リンクからご参照ください。

関連製品

仕様

キット構成内容
製品名 Nanobind PanDNA Kit
入数 24回分/1キット

構成内容
Nanobind Disks
Proteinase K
RNase A
Buffer RBC
Buffer CT
Buffer CW1
Buffer CW2
Buffer PW1
Buffer CLE3
Buffer BL3
Buffer LTE
Buffer NPL
Buffer SB
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