Cell migration assayでは、どれくらいの細胞数で細胞を播種する等の基準はありますか？

一般的には、細胞の遊走実験では、カルチャーインサート内で最終的にコンフルエントになるように播種することが理想とされます。

また、すべての実験を通して、可能な限り均一な細胞密度で比較を行う必要があるため、この点をコントロールできる細胞数で播種してください。

 

＜例：ibidi社で使用しているプロトコル＞

1. Prepare a cell suspension of 5 x 10⁵ cells/ml.
2. Seed 70 µl / 100 µl into each well (35,000 cells per well when using the Culture-Insert 2 Well or 3 Well; 55,000 cells per well when using the Culture-Insert 4 Well).
3. Incubate at 37 °C for 24 hours.
4. Remove the Culture-Insert with sterile tweezers.
5. Fill the µ-Dish with 1 ml of fresh medium.
6. Put the µ-Dish into a stage top incubator on an inverted microscope.
7. Observe the cell-free gap with a 5x … 20x objective lens.
8. Start video microscopy (one frame for every 10 minutes), and then run for 24 hours.