Q
FastGene™ ScriptaseⅡ 5×ReadyMix(NE-LS64)の逆転写反応温度(42℃)について質問です。FastGene™ Scriptase Ⅱ(NE-LS53)とFastGene™ Scriptase Ⅱ cDNA Synthesis(NE-LS63)の推奨逆転写反応温度は42℃~50℃ですが、なぜFastGene™ ScriptaseⅡ 5×ReadyMixは42℃なのでしょうか?
これは、FastGene™ ScriptaseⅡ 5×ReadyMix(NE-LS64)にのみ
「Helper Protein(補助タンパク質)」が含まれるためです。
Helper Proteinは、RNAの高次構造形成を抑制し、
テンプレートが低濃度の場合に、反応効率を高める作用を有しています。
このHelper Proteinの活性を維持するために、逆転写反応温度は42℃を推奨しています。
対して、FastGene™ Scriptase Ⅱ(NE-LS53)と
FastGene™ Scriptase Ⅱ cDNA Synthesis(NE-LS63)では、
Helper Proteinが含まれないため、反応温度を50℃まで上げることが出来ます。
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