『試料を調製する際には、青色励起の蛍光プローブ（FAM など）を必ず加えてください』と説明書に記載があります。ROXなど、別のラベルプローブを用いる場合にも、FAMラベルプローブは必須になるのでしょうか？

はい。FAMラベルプローブは、試料中（反応液中）に必須です。

 

これは、FAMラベルプローブが、測定チップ内のマイクロ流路内の反応液検知にも使用されているためです。
FAMラベルプローブが含まれていない場合では、流路内に反応液が無い状態と誤判定されるため、
反応液の制御が行えず、正しく反応が行われません。
そのため、FAMラベルプローブが反応系に含まれない場合においても、
増幅に影響しないFAMラベルプローブを通常の使用濃度と同じ終濃度（200nM以上）になるよう試料と混合してご使用下さい。

 

例）ROXの蛍光プローブを用いる場合（KAPA３G Plant）

・2x Reaction Buffer　
・Kapa 3G Plant Polymerase
・Primer（Forward）　　　　　　　　Final 700nM 以上
・Primer（Reverse）　　　　　　　　Final 700nM 以上
・FAM 用Probe　　　　　　　　　　　Final 200nM 以上
・ROX 用Probe　　　　　　　　　　　Final 200nM　以上