ライトサイクラー480用 RNA マスター加水分解プローブ

ライトサイクラー480用 RNA マスター加水分解プローブ

(LightCycler® 480 RNA Master Hydrolysis Probes)

ロシュ・ダイアグノスティックス株式会社

製品概要

LightCycler480/96/Nano用 1ステップリアルタイムPCR試薬ミックス (Probe Kit)

アプリケーション

LightCycler® 480 RNA Master Hydrolysis Probesはeasy-to-useなホットスタート反応ミックスであり、加水分解プローブ(例, ユニバーサルプローブライブラリー)を用いたLightCycler® 480システムでの、迅速で正確なサイクリングコンディションにおける1ステップRT-PCRにご使用いただけます。

利点

  • より短い逆転写反応やサイクリング時間でアッセイ時間を節約でき、96- または、384-ウェルプレートにおいて45分以内に正確な定量PCRデータが得られます。
  • キットに含まれる特別なエンハンサーによりシグナルのダイナミックスレンジと感度(トータルRNAを0.1 pgまで下げられます)を上げることができます。
  • ターゲットとリファレンス遺伝子のマルチプレックスアッセイにご利用いただけます。
  • 1つの反応中で、DNAとRNAウイルスのアッセイを組み合わせて実施することも可能です。

製品の記述

キットには反応試薬として、RNA master mix (バッファ, dNTP, 酵素), Mn(OAc) 2ストック溶液, PCRグレードの水, エンハンサー溶液が含まれております。LightCycler® 480 RNA Master Hydrolysis ProbesはPCR産物のキャリーオーバーを防ぐために熱不安定性ウラシルDNAグリコシラーゼと組み合わせてご利用いただくことも可能です。

背景

ホットスタートはTth DNAポリメラーゼにアプタマーを組み合わせてなされています。
Tth DNA ポリメラーゼは耐熱性酵素でRNA依存性逆転写活性とDNA依存性ポリメラーゼ活性を持ち、1チューブ中で逆転写反応とPCRを一緒に行うことができます。
オリゴヌクレオチドのアプタマーはポリメラーゼの活性中心に結合しており、Tth酵素の反応最適温度以下において、核酸に結合することを阻害します。よって、反応試薬のセットアップ時における、プライマー伸長が起こることを防ぐことができ、RTステップ前の過熱変性が引き続き実施されます。加熱変性時において、アプタマーは酵素から解離し、逆転写反応やDNAポリメラーゼ反応が開始されます。さらに、Tthの推奨インキュベーション温度(61℃)はRNAの2次構造による悪影響も緩和いたいます。この結果、高い効率と特異性を持ってcDNA合成が行われ、これにより高い効率と特異性を持ってPCRを行うことがが可能となります。
アプタマーによるホットスタート法は付加的なインキュベーションステップやピペッティングステップや反応時間の延長の必要ないため非常に効果的で有用なシステムです。このアプタマーによるホットスタート法はその他の酵素過程や、増幅産物のオンライン検出、その後のハンドリングステップなどを阻害いたしません。

 

品質管理

機能テスト: LightCycler® 480 RNA Master Hydrolysis ProbesはHeLaのトータルRNAのβアクチンをターゲット遺伝子として、ユニバーサルプローブライブラリーによるアッセイをLightCycler® 480システムを用いて機能テストされている。

仕様

保管温度冷凍 (-20℃)
毒劇なし

キット内容

  1. LightCycler® RNA Master Hydrolysis Probes, 2.7x conc.
  2. Mn(OAc)2 Stock Solution, 50 mM
  3. H2O, PCR-grade
  4. Enhancer solution, 20x conc.

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04991885001 LightCycler480用 RNA Master Hydrolysis Probe (1step qPCR probe Kit) 500反応分/20ul (5ml) 在庫わずか

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